现将1项我院参与的2020年度厦门市科技进步奖项目进行公示，公示内容详见附件，公示期：2020年10月19日至10月23日，公示期内如对公示内容有异议，请与医院科研处联系，联系人：程梦明，联系电话：62923103。

科 研 处

2020年10月19日

附件：

2020年拟报厦门市科技进步奖公示信息

1. 项目名称：人类卵母细胞玻璃化冷冻方法体系的优化及评估卵子质量新方法 的探索

2. 提名单位：厦门大学附属第一医院

3. 主要完成单位：

厦门大学附属第一医院、安徽医科大学第一附属医院、厦门弘爱医院

4. 主要完成人及贡献

李友筑，章志国，曹云霞，吴荣锋，李娜，颜晓红，周卫东，陈蓓丽

1） 李友筑：在项目中主要负责对课题的设计，总体实验安排、质控及调配等工作，同时负责数据分析及论文修改。参与闽西南地方医院首例人类卵子玻璃化冷冻技术体系的建立，对本项目的创新点1和2有重要贡献。（1）国内率先应用扫描电镜、透射电镜和液晶偏振光显微镜成像系统比较了观察两种冷冻方法对人和小鼠卵母细胞纺锤体与第一极体 (Pb) 的夹角、表面积、卵透明带内层光阻值、外层光阻值和卵母细胞超微结构的影响。结果发现相比程序化冷冻，玻璃化冷冻对人和小鼠卵母细胞纺锤体和卵透明带的损伤及对卵母细胞的发育潜能的影响都较小，可以作为卵母细胞冷冻的一种有效方法。（2）国内率先探讨了玻璃化冷冻技术不影响ART小鼠子代胎盘组织中生长发育印记基因Snrpn的表达水平。该成果的发现为胚胎的玻璃化冷冻技术安全性提供了理论支撑。研究成果以第一作者或者通讯作者发表文章4篇。

2） 章志国：对本项目的创新点3、4和5有重要贡献。在国际上率先建立了一套具有自主知识产权的微流控技术平台，利用微流控技术对人单个卵子在不同温度、不同低温保护剂的干预下细胞膜生物学参数的高精度表征，并分析了人类卵子在冻融过程中损害其发育能力的相关因素和机制，这一创新性的研究成果为研究团队优化人类卵子冷冻技术体系提供了理论基础，并形成了一种具有自主知识产权的人类卵子玻璃化冷冻冷冻保护剂（ZL201510077424.2），建立了一套高效安全的人类卵子冷冻技术体系，实质性地提高了人类卵子冷冻的技术水平。研究成果以第一作者或者通讯作者发表文章5篇，授权发明专利1项。

3） 曹云霞：对本项目的创新点3、4和5有重要贡献。参与建立并完善安徽省人类卵子玻璃化冷冻技术体系：参与建立人成熟失败卵母细胞体外培养成熟的技术平台。这些研究成果和技术平台为研究团队优化人类卵子冷冻技术体系提供了理论基础和技术保障。研究成果以通讯作者发表文章4篇，授权发明专利1项。

4） 吴荣锋:在课题中主要负责采用扫描电镜、透射电镜和液晶偏振光显微镜成像系统比较了观察两种冷冻方法对人和小鼠卵母细胞纺锤体与第一极体 (Pb) 的夹角、表面积、卵透明带内层光阻值、外层光阻值和卵母细胞超微结构的影响。主要负责这部分的实验操作，数据分析和文章撰写。结果发现相比程序化冷冻，玻璃化冷冻对人和小鼠卵母细胞纺锤体和卵透明带的损伤及对卵母细胞的发育潜能的影响都较小，可以作为卵母细胞冷冻的一种有效方法。研究成果以通讯作者和共同通讯作者发表文章2篇。

5） 李娜：负责采用扫描电镜观察两种冷冻方法对小鼠卵母细胞纺锤体与第一极体 (Pb) 的夹角、表面积、卵透明带内层光阻值、外层光阻值和卵母细胞超微结构的影响。是创新点1的主要完成人，作为通讯作者发表文章1篇，主要参与者发表文章2篇。

6） 颜晓红：主要负责临床促排方案的制定和实际操作者，参与闽西南地方医院首例人类卵子玻璃化冷冻技术体系的建立，对本项目的创新点1有重要贡献。研究成果以主要完成人发表文章2篇。

7） 周卫东：参与人类卵子玻璃化冷冻技术体系的建立，对本项目的创新点1有重要贡献。研究成果以主要完成人发表文章2篇。

8） 陈蓓丽：参与建立安徽省人类卵子玻璃化冷冻技术体系的建立，同时是人未成熟卵子体外培养及冷冻保存的主要参与者；在此平台上进行人类卵子的深低温冷冻保存机制研究，分析了人类卵子在冻融过程中损害其发育能力的相关因素和机制，这些研究成果和技术平台为研究团队优化人类卵子冷冻技术体系提供了理论基础和技术保障。对创新点3有重要贡献，研究成果以参与作者发表文章SCI论文1篇。

5. 项目简介：

随着高龄助孕患者越来越多，如何提高卵子利用率是当前女性生育力保存的重要任务。目前临床遇到的瓶颈主要包括卵子冷冻方法的选择，未成熟卵子复苏后发育潜能低，卵子质量评估和鉴定手段仍然较为主观等问题。该项目借助液晶偏振光显微镜成像系统、扫描电子显微镜、微流控芯片等平台，采用玻璃化和程序化冷冻解冻，微流体灌注，未成熟卵子体外培养、蛋白印迹等多种技术，围绕卵子冷冻方案的改进和卵子质量评估新方法的开发取得重大突破。该项目的创新点如下：

1) 福建省内率先发现相比程序化冷冻，玻璃化冷冻对人和小鼠卵母细胞纺锤体和卵透明带的损伤及对卵母细胞的发育潜能的影响都较小，可以作为卵母细胞冷冻的一种有效方法。

2) 国内率先发现玻璃化冷冻技术对子代胎盘组织生长发育印记基因Snrpn表达水平没有显著影响，这提示玻璃化冷冻技术的安全性。

3) 国内率先发现经过玻璃化冷冻解冻的未成熟卵母细胞采用7%乙醇人工激活（AOA）后形成高质量胚胎率和囊胚率明显高于非AOA组。

4) 国际上率先建立了一套具有自主知识产权的微流控技术平台，实现利用微流控技术对人单个卵子在不同温度、不同低温保护剂的干预下细胞膜生物学参数的高精度表征。

5) 国际上首次研发了一种新型的微流控灌注方法，用于在芯片上表征人类卵母细胞的卵膜输运特性。

6.主要知识产权证明目录：

1) 李友筑,李娜,颜晓红,周卫东,陈琼华,周余来,吴荣锋*.玻璃化冷冻和程序化冷冻方法对人类卵母细胞骨架及其发育潜能的影响[J].中华生殖与避孕杂志,2018,38(9):709-717.

2) Youzhu Li, Na Li, Wei Li, Xiaohong Yan, Weidong Zhou,Rongfeng Wu*, Chen Zhang*. Vitrification of mouse oocyte versus slow freezing: evaluation of ultrastructure and development potential[J]. Int Clin Exp Med, 2018:11(12):13092-13099. （JCR 4区）

3) 姚建凤,黄燕芳,黄荣富,林素霞,郭彩琼,吴培雅,李友筑*,胡继芬*.玻璃化冷冻对体外受精-胚胎移植出生子代胎盘印记基因Snrpn表达的影响[J].中华生殖与避孕杂志,2019,39(2):97-102.

4) Youzhu Li, Qiaobin Liu, Qionghua Chen, Xiaohong Yan, Na Li*. Insulin-like growth factor 1 promotes cumulus cell expansion and nuclear maturation of oocytes via Pi3K/Akt pathway[J]. Int J Clin Exp Pathol, 2016,9(11):11436-114443. （JCR 4区）

5) ZhiGuo Zhang, Yu Liu, Qiong Xing, Ping Zhou and Yunxia Cao. Cryopreservation of human failed-matured oocytes followed by in vitro maturation: vitrification is superior to the slow freezing method. Reproductive Biology and Endocrinology, 2011,12;9:156. （JCR 3区）

6) Yu Liu, YunXia Cao,ZhiGuo Zhang and Qiong Xing. Artificial oocyte activation and human failed-matured oocyte vitrification followed by in vitro maturation. Zygote 2013, 21(1):71-6. （JCR 4区）

7) Zhiguo Zhang, Tianjuan Wang , Yan Hao, Fazil Panhwar, Zhongrong Chen, Weiwei Zou, Dongmei Ji , Beili Chen , Ping Zhou, Gang Zhao, Yunxia Cao. Effects of trehalose vitrification and artificial oocyte activation on the development competence of human immature oocytes. Cryobiology. 2017, 74:43-49. （JCR 4区）

8) Gang Zhao,Zhiguo Zhang, Yuntian Zhang, Zhongrong Chen, Dan Niu, Yunxia Cao and Xiaoming. A microfluidic perfusion approach for on-chip characterization of the transport properties of human oocytes. Lab Chip. 2017 Mar 29;17(7):1297-1305. （JCR 1区）

9) Zhongrong Chen,Zhiguo Zhang, Xiaojie Guo, Kashan Memon, Fazil Panhwar, Meng Wang, Yunxia Cao, and Gang Zhao. Sensing Cell Membrane Biophysical Properties for Detection of High Quality Human Oocytes human oocytes. ACS Sens. 2019, 4, 192-199. （JCR 1区）

发明专利清单

1) 人类卵母细胞冷冻保护剂. 曹云霞，章志国. ZL201510077424.2, 授权公告日：2016年8月24日

7. 推广应用情况：

本项目的研究已于湖北十堰市人民医院、宜春市妇幼保健院、贵港市人民医院、中国人民解放军联勤保障部队第906医院，河北省涿州市医院生殖中心开展应用。通过本研究，实质性推动了卵子冷冻和卵子质量评估的进步，收到良好效果，具有明显的社会效益和广泛的应用前景。